奥秘地球首页 > 科技前沿 > 正文

基因编辑技术的发展史

时间:2019-09-04 04:37:36 浏览量:
用手机看
用手机看
扫描到手机,内容随时看

扫一扫,用手机看文章

基因编辑(gene-editing)的基本原理其实就类似 word 程序中的查找、替换或者删减过程,即人为地修饰宿主细胞 DNA 序列后,实现对特定的目的基因片段的「编辑」——敲除/敲入,从而达到改变宿主细胞的基因型的目的。

随着科学技术不断进步,基因编辑技术已经日益成熟,想要实现对基因组的编辑变得不再那么困难,特别是第三代技术 CRISPR/Cas9 的出现,目前被认为是最简单高效的基因编辑手段。

基因编辑技术的发展史基因编辑技术的发展史

下面小编就带着大家看看基因编辑是如何一步步壮大的。

最新技术:CRISPR/Cas9(成簇的规律性间隔的短回文重复序列)

出现时间:2013 年

组成单元:成簇的规律性间隔的短回文重复序列 CRISPR + 核酸内切酶 Cas9

发现过程:CRISPR 系统是古细菌和细菌的一种不断进化适应的免疫防御机制,早在 1987 年发现大肠杆菌里有串联间隔重复序列,直到 2002 年被命名为 CRISPR(Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats)。2012 年 CRISPR/Cas9 的详细作用机制被发现,并预测可作为基因编辑技术。

作用原理:人工设计的 gRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等。

应用:1. 构建基因编辑的模式动物;2. 遗传育种;3. 基因治疗。

优点:较前两代技术更加高效、快捷、准确、廉价。

缺点:1. 有局限性,靶序列前无 PAM 序列不能切割;2. 仍存在一定的脱靶效应。

重大突破:已成立多家 CRISPR 相关公司,致力于用来治疗基因遗传病,已在很多疾病取得较好临床前效果。

共同点:切割 DNA 后造成的损伤及修复过程

DNA 双链断裂后,主要通过易错性的非同源末端连接(Non -homologous end joining, NHEJ)以及高保真性的同源重组(homologous recombination HR)进行修复,最终会造成基因敲入(knock in)、敲除(knock out)、缺失(deletion)及基因修饰(gene modification)这几种类型。

第二代技术: TALEN(转录激活样效应因子核酸酶)

出现时间:2011 年

组成单元:识别特异 DNA 序列的蛋白分子 TALE + 核酸内切酶 FOKI

发现:源于黄单胞菌属(Xanthomonas)植物病原菌,它通过 III 型分泌系统将效应蛋白(TALEN(Transcription Activator-like effector, TAL effector))输入植物细胞质内,类似于模拟真核细胞转录因子对宿主细胞进行重编程。

作用原理:

1. 人工设计识别特异 DNA 序列的 TALEN 与目标 DNA 序列结合;

2. FokI 核酸内切酶切割 DNA 双链,双链断裂 DNA 后,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等。

TALEN 包括中间串联重复结构域,核定位信号以及酸性转录激活结构域,且高度保守。TAL 效应因子对靶点的特异性是由重复模块数目和排列顺序决定的。

应用:1. 构建基因编辑的模式动物;2. 遗传育种;3. 基因治疗。

优点:平台比较成熟。

缺点:1. 依赖上下游序列;2. 脱靶率较高;3. 具有细胞毒性。

重大突破:

1.2012 年的《科学》(Science)则将 TALEN 技术列入了年度十大科技突破;

2. Cellectis 公司用 TALEN 改造的基于异源基因的 CAR-T——UCART19 成功缓解了 Layla 的不治之症–急性淋巴细胞性白血病(ALL)。

第一代技术: ZFN(锌指核酸酶)

出现时间:1996 年

组成单元:识别特定的 DNA 序列的 ZFN + 核酸内切酶 FOKI

发现:锌指结构域 ZFN(Zinc Finger Nucleases , ZFN)是真核生物中最为普遍的 DNA 结合模块

作用原理:

1. 一对人工设计的,识别特异 DNA 序列的锌指核酸酶 ZFN 与目标 DNA 序列结合;

2. FokI 核酸内切酶将形成二聚体,从而割 DNA 双链,形成双链断裂 ( double strand break, DSB),DNA 损伤后修复会造成基因敲除或敲入等。

通过加工改造 ZFN 的 DNA 结合域,便可靶向不同的 DNA 序列,进行特异性切割。

应用:构建基因编辑的模式动物;遗传育种;基因治疗。

优点:设计比较简单,效率较高。

缺点:1. 劳动量大,周期长; 2. 成功率低易脱靶; 3. 细胞毒性大。

重大突破:Sangamo Biosciences 公司基于 ZFNs 技术治疗艾滋病 CCR5 的方法已经进入临床 II 期试验,这是史上第一次应用基因编辑技术来治疗人类疾病。

基因编辑看似很高大上,又很深奥的知识,其实大家用心地经历本次的学习后,相当于已经迈向了很大一步了。总结一下,基因编辑技术至此已经发展到第三代,一代比一代高效快捷,陆续也一直有新技术出现,相信编辑基因组 DNA 会更加简单。

编辑:夜樱
关键词: 基因编辑
为您推荐
  • 奇观
  • 生物
  • 民俗
  • 探索
  • 科技
  • 未解